时光荏苒,白驹过隙。转眼间,已在实验室学习一整年。在各位老师的悉心指导下,我学习到了许多课题上,思想上,为人处世上的经验和方法,我在此总结并做了下一年的工作安排。
一、课题上
在技术方面,我跟随老师和师姐,以及同学之间互相帮助和学习,在实验技术上有了较大的提升。从细胞转染做PCNP的敲低和过表达、筛选稳定株、western blot验证蛋白的表达、提RNA做qPCR检测PCNP的mRNA转录水平,到运用cck8、MTT、EDU、Tunel、划痕实验、Transwell迁移实验、Invasion侵袭实验、平板克隆实验、软琼脂集落形成实验一系列细胞功能实验来检测PCNP敲低或过表达对细胞生长调节的影响;其次,还通过做老鼠胸腺细胞,学习了HE染色、免疫组织化学、免疫荧光等实验技术;另外,还跟随师姐学习了裸鼠成瘤实验技术。这些实验技术我铭记于心并加以运用,以尽快完成我的课题。我又通过学习和运用TIMER2.0、GEPIA、STRING、NCBI、Gene Card等生物信息学网站了解和学习PCNP,并预测了在食管癌细胞系中可能的与PCNP存在相互作用关系的蛋白BMI-1。
在课题进展方面,我的课题:PCNP对食管癌生长的作用机制研究。我从五种癌细胞系中筛选出两种细胞系,构建两种食管癌细胞系的稳定株并验证敲低和过表达效果,再通过一系列功能实验验证PCNP敲低或过表达对细胞生长的影响,再通过western blot验证PCNP敲低或过表达后,相关凋亡蛋白、自噬蛋白以及PI3K-AKT-mTOR、Smad2-Smad3-TGF-β信号通路的表达,再通过裸鼠成瘤实验验证动物体内PCNP敲低或过表达对异种移植瘤生长的影响,最后再通过co-IP检测PCNP与预测到的相关基因BMI-1的相互作用关系。通过一年的学习,现阶段我的课题进展是:从五种食管癌细胞系中筛选了两种食管癌细胞系EC9706和K450,并已构建好两种食管癌的PCNP敲低和过表达的稳定株。EC9706的敲低组及过表达组的细胞功能实验已完成,并用western blot检测了部分凋亡蛋白的表达,K450敲低和过表达的稳定株做完了增殖、凋亡、迁移相关的功能实验。另外,于今年12月份,完成了我的毕业论文的开题。
二、在思想上
我不断提升自己的科研素养和科研思维,多向老师和周围的同学请教,不断提高自己的阅读能力,实验技术。多看文献,从文献中发现问题,寻找方法、解决问题,提升视野,不断地端正自己的学习态度。在学习之余,对于课题组内的各种任务积极完成,不断学习和提高自己的学习能力、工作能力、平衡各种任务的能力。在平日不断地实验和探究的过程中,我深刻体会到了科研成果的来之不易,通过不断强化和学习实验技术,在多次失败的实验中学习和总结,认真细致的做好每天的实验,永不言弃,相信宝剑锋从磨砺出,梅花香自苦寒来,坚持不懈,认真完成课题,加快实验进展。
三、在为人处世上
通过向老师学习,通过与同学们交流,我懂得了取长补短,团结协作。我深刻感受到了“三人行,必有我师焉”,“择其善者而从之,其不善者而改之”的道理。认真完成老师交代的任务,认真做好自己的工作,尊敬师长,互帮互助,扬长避短。
四、2022年计划
1. 多读文献,多从文献中学习,夯实理论,寻找课题创新点。不断发现和学习新的知识和方法。
2. 巩固实验技术,在2022年完成课题。补充功能实验、蛋白条带,尽早开始动物实验,撰写论文。
3. 尽快完成综述硫化氢和细胞非程序性死亡的撰写,并争取发表。
4. 学有余力之时,培养自己的兴趣爱好,锻炼身体,多向良师益友请教和学习,不断提高自己的素养和能力。